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为研究禽流感等敏感病毒及其他致病因子对肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC-Ⅱ)的致病性,建立了鸡AEC-Ⅱ细胞体外培养方法.采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶联合消化法时 18 日龄鸡胚肺组织进行消化,经差速离心和免疫黏附,获得了鸡 AEC-Ⅱ细胞,再经纯化、体外培养和碱性磷酸酶染色法鉴定.结果表明,鸡AEC-Ⅱ细胞在接种后18 h开始贴壁进入适应期,细胞为圆形,呈岛屿状生长;接种后 24~72 h,进入对教生长期,细胞为多边形,并融合成单层,胞浆内有明显的颗粒;接种后第 4 天细胞数量达到高峰(1.38 × 105个/mL),并进入稳定生长期,胞浆内颗粒开始减少;接种后6~7 d,细胞进入衰退期,胞浆内颗粒显著减少,细胞逐渐死亡、脱落.另外,4代(F4)之前的AEC-Ⅱ传代细胞贴壁时间早,形态均一,纯度高.说明接种后24~72 h内获得的AEC-Ⅱ原代细胞和F4之前的传代细胞可以供体外试验研究. |
关键词: 鸡胚 肺泡上皮Ⅱ型细胞 原代培养 传代培养 细胞生长曲线 细胞鉴定 肺泡上皮 Ⅱ型细胞 培养与鉴定 type epithelial alveolar identification Culture chicken 体外试验 原代细胞 形态 时间 传代细胞 脱落 死亡 衰退期 稳定 细胞数量 颗粒 |
DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2008.01.004 |
修订日期:2007-07-24 |
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Culture and identification of alveolar epithelial type Ⅱ cells from chicken |
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