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针对棉花组织总RNA难以提取、不同组织的提取方法难以统一的问题,借鉴Jaakola等的越橘果实总RNA提取方法(即CTAB-PVP法),对棉花组织总RNA的提取效果进行了分析。实验结果表明:得到的棉花纤维、胚珠、叶片、胚根、花瓣、下胚轴和花药各组织的RNA完整性好,其D260/D280比值为1.7~2.0,产率30~180pg/g(鲜质量);用开花后15d纤维的RNA为材料进行反转录,再利用RT-PCR和3’RACE技术进行克隆,各获得1个大小为542和712bp的cDNA克隆,经序列分析鉴定,这2个片段分别编码棉花微管结合蛋白和微丝结合蛋白。 |
关键词: 棉花 RNA提取 |
DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2006.01.012 |
投稿时间:2005-05-07 |
基金项目:国家转基因植物研究和产业化专项基金 |
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Extraction of total RNA from cotton (Gossypium hirsutum L.) tissues with CTAB-PVP method |
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Key words: CTAB-PVP |