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以‘新大久保’桃为试材,利用正交设计直观分析法和2因素完全随机试验优化了桃SSR技术中PCR反应体系.试验结果表明,适宜桃遗传分析的SSR技术体系为:在25 μL反应体系中Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1 U和50~100 ng;Mg^2+ 、dNTP和引物最适终浓度分别为1.5~2.0 mmol/L、0.20~0.28 mmol/L和0.2~0.6 μmol/L.利用30个桃品种验证此反应体系,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在100~300 bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好. |
关键词: 桃 SSR 体系优化 正交直观分析法 完全随机试验 |
DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2005.06.160 |
投稿时间:2005-09-14 |
基金项目:中国博士后科学基金资助项目(2004035080) |
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Optimization of SSR reaction system of peach |
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Key words: peach simple sequence repeats system optimization orthogonal design-direct analysis completely ran-domized design |