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比较猪瘟病毒E2基因的真核表达质粒proVAX-E2n和pVP22-E2n体外表达效率以及体内的免疫效果,以从中选出高效的猪瘟病毒核酸疫苗.将上述表达载体转染Hela细胞进行体外表达后,用RT-PCR和间接ELISA法检测Hela细胞体内和体外表达产物;免疫6~8周龄昆明白小鼠, 用间接ELISA法和MTS法检测小鼠血清中CSFV特异性IgG抗体水平以及脾脏中淋巴细胞增殖功能.结果表明2种E2重组质粒均能在Hela细胞中正确表达,且proVAX-E2n的E2蛋白表达量(OD值为0.575 4)明显高于pVP22-E2n(OD值为0.306 05)(P〈0.05);proVAX-E2n刺激机体产生的抗体水平(最高抗体滴度为1:2 200)显著高于pVP22-E2n免疫组(最高抗体滴度1:1 600);淋巴细胞增殖结果显示proVAX-E2n(刺激指数4.073)与pVP22-E2n(刺激指数2.205)相比,能诱发小鼠产生更强的CSFV的特异性淋巴细胞增殖反应.本研究表明proVAX真核表达载体对E2基因体外表达效率和小鼠免疫效果均高于pVP22真核表达载体. |
关键词: 真核表达 猪瘟病毒 E2n基因 抗体 淋巴细胞增殖 |
DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2005.06.155 |
投稿时间:2005-03-04 |
基金项目:国家高技术研究发展计划资助项目(2003AA241110和2004AA213102);国家自然科学基金资助项目(30271220) |
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Comparisons of the expression efficiencies and immune effects of two eukaryotic vectors encoding CFSV E2 gene |
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Abstract: |
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Key words: eukaryotic expression CSFV E2 gene antibody lymphocytes proliferation |