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用禽脑脊髓炎病毒(AEV)Van Rockel毒株接种6日龄SPF鸡胚,感染11 d后,分别收集鸡胚、绒毛尿囊膜及尿囊液、鸡胚剔除羽毛、眼球、爪和喙后与绒毛尿囊膜一起,制成匀浆,反复冻融3次,通过2次氟碳(三氯三氟乙烷)从全胚匀浆中萃取制备AE琼扩抗原(AGP-Ag)用进口标准AE AGP试剂进行标化,结果发现:制备的AD AGP-Ag与标准阳性血清之间的清晰、致密的沉淀线,并与标准AE AGP-Ag的沉淀线完全吻合,表明两者的沉淀反应一致,从而了AE AGP-Ag制备新方法-“全胚双氟碳法”其制备AE AGP-Ag有如下特点:①产量高,平均每3个SPF鸡可获得1mL AE AGP-Ag; ②特异,与类症阳性血清无交叉反应;③敏感,AGP试验中毋需重复加样,普通琼脂即可出线;④稳定性好,保存期长;⑤与标准AE AGP-Ag阳性检出符合率均达100%。本研究表明用“全胚双氟碳法”制备的AEAGP-Ag达到了进口标准,AEAGP-Ag质量,可用于SPF鸡AE抗体的监测,且生产成本低,也可用于商品鸡AEV感染的检测。 |
关键词: 禽脑脊髓炎 琼扩抗原 全胚双氟碳法 制备 抗体监测 |
DOI: |
修订日期:2000-09-13 |
基金项目:农业部九五重点资助项目(39670073) |
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Preparation of theAgar-Gel-Precipitating Antigen for Avian Encephalomyelitis by Double FluorcarbanExtractions from Whole Embryo |
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Abstract: |
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Key words: avian encephalomyelitis(AE),agar gel precipitating antigen(AGP Ag),SPF chicken |