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本实验建立了用反相高压液相色谱(HPLC)同时测定强化奶粉中维生素 A,D3,E,K1的方法。采用部分纯化的脂肪酶水解样品,在0.05 mol·L-1、pH7.6的磷酸缓冲液中.36°±1℃反应4 h,加10 mol·L-1氢氧化钠终止酶反应后用已烷提取。选用μ-Bondapak C_(18)为色谱柱,98%的甲醇为流动相,紫外265 nm,荧光 EX 325 nm、EM 480 nm 双通道检测。保留时间分别为4.875,9.00,10.58,15.45 min。维生素 A,D_3,E,K_1的最小检出限分别为0.64 ng/20 μL,0.25 ng/20μL,5 ng/20μL,0.7 ng/20 μL,回收率分别为90.5%~103.6%,88.4%~95.6%,91.7%~98.8%,91.5%~99%。讨论了一些实验因素的影响,同时测定了几种强化奶粉的维生素 A,D_3,E,K_1的含量。 |
关键词: 高压液相色谱 脂溶性维生素 脂肪酶 酶解 皂化 |
DOI: |
投稿时间:1992-10-13 |
基金项目: |
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Simulataneous Determination of Fat Soluble Vitamins A,D3,E and K1 in Fortified Milk Powders by HPLC |
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Key words: HPLC fat soluble fat lipase enzymatic hydrolysis saponification |