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利用 Lichro CART Superspher CH-8,4μm,250×4mmI.D.(Merk,Darmstand,F.R.G)作固定相,乙晴一醋酸钠作流动相的反相高效液相色谱系统,对含有20种标准氨基酸的溶液和8种不同饲料的蛋白水解液,用 FMOC(9-flurerylmethl chloroformate)在室温溶液状态下衍生后,通过调节梯度洗脱程序和流动相极性,对各种氨基酸进行了有效的分离,并在萤光检测仪上 EX=260nm,EM=310nm 条件下按不同浓度水平进行了重复定量测定。测定结果表明,FMOC 萤光衍生剂具有高度的灵敏度和稳定性,氨基酸浓度和萤光强度之间在测定范围内呈线性关系,不同次衍生的氨基酸标样之间,除赖氨酸 cv=9.6%精氨酸的 cv=5.4%以外,其余氨基的变异在4%以内,不同次水解饲料样本之间,大多数氨基酸的 cv 在10%以内。 |
关键词: 定量测定 测定结果 检测仪 洗脱程序 饲料 精氨酸 氨基酸分析 赖氨酸 灵敏度 醋酸钠 |
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DETERMINATION OF AMINO ACID CONTENT IN FEEDSTUFFS WITH THE HELP OF HPLC |
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